PCR實(shí)驗(yàn)又稱基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。
根據(jù)衛(wèi)生部的要求,每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)必須相互獨(dú)立,不能直接連接。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)都設(shè)有專門的大門,供工作人員更換工作服和工作鞋。進(jìn)入每個(gè)工作區(qū)必須嚴(yán)格按照一個(gè)方向的順序,即只從試劑制備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)I和左側(cè)純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)2到后純化區(qū),以避免交叉污染
那么標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)有哪些?
一、PCR實(shí)驗(yàn)室布局
PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通。如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。
二、PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)主要設(shè)備
1、試劑準(zhǔn)備區(qū):本區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。
2、樣品制備區(qū):本區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
3、擴(kuò)增區(qū):本區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。
三、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾
實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固、氣密性好;所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過(guò)渡;墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
五、PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
1、幾個(gè)區(qū)域的大小設(shè)置情況,試劑準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),空間可以相對(duì)小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應(yīng)大一些。
2、試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。
3、PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
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